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静脉血液标本采集
1.静脉血液标本采集前患者的准备
1.1 饮食
（1）患者在采血前不宜改变饮食习惯，24 h内不宜饮酒
（2）需要空腹采血的检测项目包括（不限于）
<空腹要求至少禁食8 h，以12 h～14 h为宜，但不宜超过16 h;宜安排在上午7:00～9:00采血。空腹期间可少量饮水>
糖代谢：空腹血糖、空腹胰岛素、空腹C肽等；
血脂：总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白A1、载脂蛋白B、脂蛋白a、载脂蛋白E、游离脂肪酸等
甲状腺功能
肝功能
血液流变学（血粘度）
骨代谢标志物：骨钙素、I型胶原羧基端肽β特殊序列、骨碱性硫酸酶等
血小板聚集率（比浊法）
1.空腹采血：
为什么要空腹采血： ①参考区间的制定是以健康人空腹抽血状态的检测结果为依据，如果不空腹，则不具有可比性 ②人进食半小时内血液会成乳糜状，很多检验项目需要经过比色的过程，乳糜血会严重干扰影响结果
- 空腹要求至少禁食8 h，以12 h～14 h为宜，但不宜超过16 h。宜安排在上午7:00～9:00采血
- 空腹期间可少量饮水。不能喝含糖的饮料、咖啡、茶水、酒等
- 建议采血前24h，不宜剧烈运动，检查当天宜避免情绪激动，采血前静息至少5min.
- 患者在采血前不宜改变饮食习惯
- 不易改变饮食习惯（抽血前一天晚上，保持正常生活习惯，饮食清淡即可）
空腹过久：空腹时间大于16h，会由于过度饥饿，导致血清白蛋白、葡萄糖、补体C3及转铁蛋白的含量明显下降，血清胆红素也会由于清除率减少而升高.
不正常饮食 | 可能的影响 |
高蛋白及高嘌呤的食物 | 尿酸或者尿素氮升高，但对肌酐影响不大 |
油腻食物 | 血清或者血浆呈现乳白色样浑浊而干扰血脂检测结果，导致血清甘油三酯浓度太高
（若遇到这种情况，建议患者素食3天在复查生化指标） |
短时间内大量高盐饮食 | 升高电解质Na和CL-的水平 |
长期较少摄入盐分 | 可能导致低钠血症，影响生化结果 |
饮酒、熬夜 | 可能引起转氨酶的升高 |
需要空腹的项目 糖代谢：空腹血糖、空腹胰岛素、空腹C肽等 血脂：总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白A1、载脂蛋白B、 脂蛋白a、载脂蛋白E、游离脂肪酸等 骨代谢标志物：骨钙素、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列、骨碱性硫酸酶等 肝功能：反映肝代谢的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆汁酸和谷氨酰转肽酶等，及反映蛋白质代谢的总蛋白、白蛋白和球蛋白等受饮食的影响较大，须空腹 肾功能(含尿酸)：尿素氮、肌酐和尿酸受饮食和运动的影响较大，须空腹。 电解质：进食会影响检查结果 免疫球蛋白、风湿三项：为防止血清标本对结果的影响，也要求空腹抽血
1.2 运动和情绪
采血前24 h，患者不宜剧烈运动，采血当天患者宜避免情绪激动，采血前宜静息至少5 min。若需运动后采血，则遵循医嘱，并告知检验人员
1.3 采血时间
采血时间有特殊要求的检测项目包括（不限于）：
血培养：寒战或发热初起时，抗生素应用之前采集最佳
促肾上腺皮质激素及皮质醇：生理分泌有昼夜节律性，常规采血时间点为8:00、16:00和24:00
女性性激素：生理周期的不同阶段有显著差异，采血日期需遵循医嘱，采血前与患者核对生理周期
药物浓度监测：具体采血时间需遵循医嘱，采血前与患者核对末次给药时间
口服葡萄糖耐量试验：试验前3 d正常饮食，试验日先空腹采血，随后将75 g无水葡萄糖（相当于82.5 g含一水葡萄糖）溶于300 ml温水中，在5 min内喝完。在第一口服糖时计时，并于2 h采血，其他时间点采血需遵循医嘱
其他功能试验：根据相关临床指南推荐的功能试验方案所设定的时间采血；
血液疟原虫检查：最佳采血时间为寒颤发作时。
1.4 采血体位
门诊患者采用坐位采血
1.5 输液
宜在输液结束3h后采血；对于输注成份代谢缓慢且严重影响检测结果（如脂肪乳剂）的宜在下次输注前采血。紧急情况必须在输液时采血时，宜在输液的对侧肢体或同侧肢体输液点的远端采血，并告知检验人员
5 静脉血液标本采集操作
5.1 个人防护
开始采血前佩戴医用帽子、口罩与手套
宜在完成每一位患者血液标本采集后更换新的手套；如条件不允许，至少在完成每一位患者血液标本采集后使用速干手消毒剂进行消毒；
如采血过程中手套沾染血液或破损，应及时更换。
如采血对象为多重耐药菌感染、呼吸道传染病、血源性传染病且有血液、体液喷溅风险的患者，按照WS/T 311及GBZ/T 213进行个人防护
5.2 患者身份与准备情况确认
5.2.1 患者身份确认
5.2.2 患者准备情况确认
对于饮食、运动、时间、体位、药物等有特殊要求的检测项目，采血前需根据医嘱核对并确认相关信息
5.3 采血部位的暴露
坐位采血：要求患者侧身坐，上身与地面垂直，将手臂置于稳固的操作台面上，肘关节置于垫巾上，使上臂与前臂呈直线，手掌略低于肘部，充分暴露采血部位
5.4穿刺静脉的选择
首选手臂肘前区静脉，优先顺序依次为正中静脉、头静脉及贵要静脉
5.6 绑扎止血带
（1）止血带绑扎在采血部位上方5 cm～7.5 cm的位置，宜在开始采集第一管血时松开止血带，使用时间不宜超过1 min。如某些情况止血带需要在一个部位使用超过1 min，宜松开止血带，等待2 min后再重新绑扎。如需绑扎止血带的部位皮肤有破损，宜选择其他的采血部位
(2) 在穿刺时可让患者攥拳（不可反复拍打采血部位），使静脉更加充盈，以利于成功穿刺。穿刺成功后宜让患者放松拳头，尽量避免反复进行攥拳的动作
5.5 消毒
以穿刺点为圆心，以圆形方式自内向外进行消毒，消毒范围直径5cm，消毒2次。消毒剂发挥作用需与皮肤保持接触至少30 s，待自然干燥后穿刺，可防止标本溶血及灼烧感。
静脉穿刺比较困难，在消毒后需要重新触摸血管位置，宜在采血部位再次消毒后穿刺
5.6 静脉穿刺与血液标本采集
在穿刺部位下方握住患者手臂，拇指于穿刺点下方2.5 cm～5.0 cm处向下牵拉皮肤固定静脉，避免触碰消毒区
保持针头斜面向上，使采血针与手臂呈30°左右的角度刺入静脉。成功穿刺入静脉后，可在静脉内沿其走向继续推进一些，保持采血针在静脉内的稳定
5.7 不同采血管的采集顺序如下
- a) 血培养瓶；
- b) 柠檬酸钠抗凝采血管； （蓝黑）
- c) 血清采血管，包括含有促凝剂和/或分离胶；（黄）
- d) 含有或不含分离胶的肝素抗凝采血管；（绿）
- e) 含有或不含分离胶的EDTA抗凝采血管； （紫）
- f) 葡萄糖酵解抑制采血管子
注1：用于分子检测的采血管宜置于肝素抗凝采血管前采集，避免可能的肝素污染引起PCR反应受抑。
注2：用于微量元素检测的采血管宜充分考虑前置采血管中添加剂是否含有所检测的微量元素，必要时单独采集；不宜使用注射器采集
5.8 拔针与穿刺点止血
先松开止血带
从采血针/持针器上拔出最后一支采血管
从静脉拔出采血针
拔出采血针后，在穿刺部位覆盖无菌棉签、棉球或纱布等，按压穿刺点5 min（止血功能异常的患者宜适当延长时间），直至出血停止
<不宜曲肘按压，会增加额外的压力，导致出血、淤血、疼痛等情况发生风险的增加。
如在正确按压止血的前提下出现血肿或出血持续时间超过5 min，可请临床医生对患者凝血功能进行评估及处理。
对于已形成的血肿或淤青，24 h内可给予冷敷止血，避免该侧肢体提拎重物，24 h后可热敷以促进淤血吸收
>
5.9 混匀
含有添加剂的采血管在血液采集后宜立即 轻柔颠倒混匀，混匀次数宜按照产品说明书的要求。不可剧烈震荡混匀，以避免溶血
清洁中段尿尿培养
宜采集晨尿，嘱患者睡前少喝水或不喝水，尿液在膀胱内潴留至少４ｈ以上，可降低假阴性率。无症状的患者应连续采集３天晨尿送检。抗菌药物使用前采集。
采集方法选择：尿液标本，疑为厌氧菌感染时，应以无菌注射器从耻骨上缘行膀胱穿刺术（评估膀胱内细菌感染的“金标准”）抽取：若怀疑是需氧或兼性厌氧菌的感染，则直接采集中段尿
采集：清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应分开大阴唇，男性应上翻包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围。将前段的尿液丢弃，留取中段尿液约10~20ml直接排入无菌容器中，立即送检，采集后于0.5ｈ内进行接种
清洗后不可用身边的毛巾或卫生纸擦拭，防止污染，前端尿液也会带走一部分污染细菌
运送：尿液标本应尽快送到实验室
- 若不能及时送达，应４ ℃冷藏或添加防腐剂（含0.5ml 的硼酸甘油或硼酸-甲酸钠），但均不能超过24ｈ。<添加防腐剂，防止假阳性，无法分出致病菌>
- 加入防腐剂的尿液标本，至少采集３ｍＬ 尿液量，以避免高浓度的防腐剂对致病微生物产生抑制或稀释作用
标本拒收情况：标本标识与申请单不符，标识错误或没有标识未提供采集时间及采集方法标本采集时间超过２ｈ而未４ ℃冷藏或添加防腐剂；标本４ ℃冷藏或添加防腐剂但已超过２４ｈ；连续收集２４ｈ的尿液标本导尿管尖端培养标本取自导尿患者尿袋标本送检时容器有渗漏；除耻骨上膀胱穿刺法外，采用其他方法采集标本申请做厌氧菌培养冷藏的标本不能用于淋病奈瑟菌培养（淋病奈瑟菌对热、冷、干燥、消毒剂极度敏感）
血常规
Hb
- Hb的年龄生理变化与红细胞类似，日内波动为7时达到高峰，随后下降
- 正常红细胞与血红蛋白之间比值大概约为1：30，但大细胞性贫血与小细胞低色素性贫血不成比例
- 异常血浆蛋白（球蛋白异常增高，如肝硬化患者）、高脂血症、白细胞数超30x10‘9/L、脂滴、黄疸等可产生浊度，干扰Hb的测定
（静脉血比毛细血管血低10%-15%）
红细胞平均指数
- MCV假性增高：冷凝集、严重高糖血症（葡萄糖高于600mg/L）
- MCH假性增高：高脂血血症、白细胞增多症
血沉
- 生理性：女性高于男性；妇女月经期、妊娠3个月以上者血沉加快；老人血沉增快
- 病理性：
组织损伤及坏死血沉增快
肝硬化血沉增快
白细胞
参考值
新生儿（脐带结扎至满28天）：（15-20）x10‘9/L
6个月-2岁婴幼儿：（11-12）x10’9/L
儿童：（5-12）x10‘9/L
成人：（3.5-9.5）x10‘9/L
- 严寒或暴热：高达15x10’9/L或者更高
- 妊娠与分娩：妊娠超过5个月白细胞可达15x10’9/L，妊娠最后一个月波动与（12-17）x10’9/L，分娩时可达34x10’9/L
- 中性粒细胞暂时性升高：严寒或暴热
- 中性粒细胞暂时性降低：伤寒（细菌内毒素抑制骨髓释放成熟粒细胞进入血液）
血涂片上WBC分布密度与WBC数量关系
血涂片上WBC/HP | WBC | 血涂片上WBC/HP | WBC（10’9/L） |
2-4 | 4-7 | 6-10 | 10-12 |
4-6 | 7-9 | 10-12 | 13-18 |
白细胞总数与分类白细胞数关系
白细胞总数（10’9/L） | 应该分类白细胞个数 |
<4 | 5-100 |
4-10 | 100 |
10-20 | 200 |
干扰血液分析的因素
常见因素
1.冷凝标本（管壁有细沙状黏附）：
- WBC、MCV假性增高
- RBC、HCT、PLT假性减低，特别是RBC、HCT降低尤为显著
（但RBC、HB、HCT 3个参数结果之间的关系明显不符，并由此造成MCH、MCHC等计算结果异常增）
冷凝集常见于冷凝集素综合征患者、流感、传单、支原体肺炎、淋巴瘤等
💡纠正措施： ①37℃温育30min后，重新检测 ②对于使用温育法无法纠正的重度冷凝集标本，可行温育后稀释或血浆等量置换法重新检测MCHC＜380g/L可作为冷凝集干扰被有效纠正的标志
2.脂血标本
- Hb、MCH、MCHC、电阻抗测定PLT显著假性增高：高脂血症、脂滴
（血红蛋白检测原理是比色法，引起血清浊度）
💡纠正措施：进行血浆等量置换
3.免疫球蛋白的干扰——>假性增高
- MCH、MCHC假性增高：异常血浆蛋白（球蛋白异常增高，如肝硬化患者、巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤时）
💡纠正措施：缓慢离心，吸取血浆加入等量的稀释液
4.溶血标本——>假性增高
- MCH、MCHC假性增高：DIC、药物、输血或采血不顺利等因素可引起标本溶血，血浆游离血红蛋白增加，可使MCHC假性增高，RBC明显减少
💡纠正措施：观察血涂片是否有较多RBC碎片，或与临床联系，重新采集标本
5.高胆红素标本——>假性增高
- 测定HGB升高，而MCV、RBC不变，因此MCHC计算结果异常增高。
💡纠正措施：宜在标本进行血浆等量置换
6.白细胞因素——>假性增高
- MCH、MCHC假性增高:白细胞数超30x10‘9/L
💡纠正措施：见下
白细胞
1.有核RBC——>假性增高
外周血中可出现大量有核RBC，它不能被稀释液破坏，而使WBC计数偏高
💡纠正措施：手工分类计数100个WBC遇到的有核RBC数，依据WBC校正公式进行计算
2.巨大PLT标本——>假性增高：
💡纠正措施：用手工方法对WBC进行计数
3.难溶血或溶血不良标本——>假性增高
严重肝病患者由于RBC膜抗溶性增强，导致红细胞溶血不全，红细胞与淋巴细胞大小相近，导致白细胞假性增高
💡纠正措施：采用手工方法计数WBC；用某些不受干扰的仪器检测，排除干饶
4.高浓度胆红素——>假性增高
高浓度胆红素影响WBC的计数和分群,在游离胆红素为256.1μmol/L时影响显著，384.1μmol/L时对WBC的计数影响显著，仪器无法分群
💡纠正措施：用手工方法对WBC进行计数
血小板
1.小细胞性贫血标本——>假性增高
当MCV＜70fl时，血细胞分析仪的PLT计数容易受小细胞的干扰而假性增高
判断PLT假性增高查看主要查看RDW-SD
💡纠正措施：用微镜重新计数PLT或者有荧光通道的血球仪分析
2.PLT聚集——>假性减低
- 采血不顺利时引起血小板破坏和聚集
💡纠正措施：重新采集血液；手工计数
- EDTA依赖性聚集
💡纠正措施：用不含EDTA抗凝剂稀释液立即稀释标本或显微镜重新计数PLT，同时要观察血涂片是否有PLT集聚；手工计数
- 冷凝集
💡纠正措施： ①37℃温育30min后，重新检测 ②对于使用温育法无法纠正的重度冷凝集标本，可行温育后稀释或血浆等量置换法重新检测MCHC＜380g/L可作为冷凝集干扰被有效纠正的标志
3.PLT卫星现象——>中度减少
由EDTA抗凝剂诱导引起的PLT围绕在中性粒细胞或淋巴细胞／淋巴瘤细胞周围，形成卫星现象。
💡纠正措施：立即稀释标本检测 更换肝素或枸橼酸钠作为抗凝剂的采血管
4.细胞碎片——>假性增高
判断PLT假性增高查看主要查看RDW-SD
💡纠正措施：用显微镜手工计数PLT或者有荧光通道的血球仪分析
5.血液中有凝块——>假性减低
💡纠正措施：重新抽取样本
肝功能
生化项目用量
手工法
乙肝表面抗原 10min
HIV 20min
甲乙流 15min
EV71 25min
核酸 10min
微生物致病菌
考试相关信息：